Produccion biotecnologca sinefrina

Producción biotecnológica, recuperación y purificación.

1. Se realiza una maceración mecánica del extracto o frutos (15 mg o 1 g) con agua (3 – 5 mL), por ciclos de dos a tres extracciones. Los sobrenadantes se recuperan y centrifugan a 5 000 rpm por 10 minutos y se limpian con una extracción en fase sólida en columnas de 100 mg o 400 mg colestoras de vacío.

2. Las muestras se condicionan con 20 mL de metanol seguido de 2 mL de agua. Las columnas se lavan con 2 mL de agua: metanol (75:25 v/v) y secadas a vacío.

synephrine

synephrine origin

molecular form

synephrine

1/3

3. Se eluye la p-sinefrina con 3-4 mL de metanol:isopropanol:hidróxido de amonio (78:20:2 v/v/v)y el efluente se remueve a 50°C. Se derivatizan los residuos con 100 µL de ciclohexano.

4. Se realiza un análisis previo de cromatografía de capa delgada en celulosa usando butanol: ácido acético: agua (40:10:22 v/v/v) como fase móvil.

5. Se realizó cromatografía de gas equipada con columna de silica, usando nitrógeno como gas acarreador y se realizó el análisis de CG y MS (espectrometría de masa) [1].

Sinefrina